小鼠趋化因子CCL11(Eotaxin (CCL11))elisa试剂盒

                                             小鼠趋化因子CCL11(Eotaxin (CCL11))elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗小鼠CCL11单抗（如大鼠IgG2b），靶向CCL11的N端表位（检测范围8–500 pg/mL）。

信号放大：生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统，搭配超敏TMB显色（灵敏度2 pg/mL）。

抗干扰设计：含CC类趋化因子阻断剂（如CCL24/CCL26阻断肽），交叉反应率＜0.5%。

动态范围优化

覆盖生理水平（健康小鼠血清＜10 pg/mL）至过敏/炎症状态（如哮喘模型BALF中＞200 pg/mL）。

二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗CCL11单抗固定化（批间差＜6%），可拆分使用

标准品  重组小鼠CCL11（0、8、32、125、250、500 pg/mL，含0.1% HSA冻干保护剂）

适用样本  血清、血浆（EDTA抗凝）、支气管肺泡灌洗液（BALF）、组织匀浆（含蛋白酶抑制剂）

特殊添加剂  含0.05% Proclin 300防腐剂，2–8℃保存有效期18个月

三、应用场景与科研价值

过敏性疾病研究

哮喘模型：OVA致敏小鼠BALF中CCL11＞150 pg/mL提示嗜酸性粒细胞浸润。

特应性皮炎：皮肤组织中CCL11与嗜酸性粒细胞活化正相关。

寄生虫感染

旋毛虫感染小鼠肠道CCL11水平升高（＞100 pg/mL），反映Th2型免疫应答。

纤维化疾病

肺纤维化模型中CCL11通过CCR3受体促进成纤维细胞增殖。

四、操作规范与质控要点

样本处理

BALF样本需离心（300×g，10分钟）去除细胞碎片，-80℃保存避免反复冻融。

组织匀浆需含1% Triton X-100裂解液。

实验关键

温育条件：37℃避光45分钟，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜10%）。

五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测天然CCL11及CCL11-CCR3复合物  无法区分CCL11不同糖基化修饰亚型

特异性  与CCL24/CCL26交叉反应＜0.5%  高脂血样本需超速离心（＞10,000×g）

通量  适配全自动平台  组织样本需优化裂解缓冲液

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