小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa试剂盒

一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗小鼠VCAM-1单抗（如大鼠IgG2a），靶向VCAM-1的胞外域（Ig样结构域1-7），检测范围0.1–20 ng/mL。

信号放大：生物素化二抗与链霉亲和素-HRP联用，超敏化学发光检测（灵敏度0.05 ng/mL）。

抗干扰设计：含整合素α4β1阻断肽（1 μg/mL），降低非特异性结合（与ICAM-1交叉反应＜0.3%）。

动态范围优化

覆盖基础表达（健康小鼠血清0.1–1 ng/mL）至炎症状态（如LPS刺激后内皮细胞上清＞10 ng/mL）。

 二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗VCAM-1（D1-D3表位）抗体固定化（批间差＜7%）

标准品  重组小鼠VCAM-1（0、0.2、1、5、10、20 ng/mL，含10%甘油冻存液）

适用样本  血清、血浆（肝素抗凝）、内皮细胞上清、动脉组织匀浆（需含1% NP-40裂解）

特殊添加剂  含1 mM Ca2?/Mg2?（维持蛋白构象），2–8℃保存有效期24个月

三、应用场景与科研价值

血管炎症研究

动脉粥样硬化：ApoE?/?小鼠主动脉VCAM-1表达上调（＞5 ng/mL提示斑块不稳定）。

脓毒症模型：LPS刺激后血清VCAM-1水平与内皮损伤程度正相关。

肿瘤转移机制

VCAM-1通过介导肿瘤细胞-内皮粘附促进转移（如乳腺癌肺转移模型）。

自身免疫病

EAE模型中脑微血管VCAM-1升高，反映血脑屏障破坏。

四、操作规范与质控要点

样本处理

组织样本需液氮速冻，裂解液含蛋白酶抑制剂（如1 mM PMSF）。

避免使用EDTA抗凝血浆（螯合Ca2?影响VCAM-1构象）。

实验关键

温育条件：37℃避光1小时，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜8%）。

五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测可溶性及膜结合型VCAM-1  无法区分剪切型（sVCAM-1）与全长形式

特异性  与ICAM-1/MAdCAM-1交叉反应＜0.5%  溶血样本需超速离心（＞12,000×g）

通量  适配自动化平台  组织样本需验证裂解效率

公司正在出售的产品：