牛轮状病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

牛轮状病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒专为牛轮状病毒（Bovine Rotavirus）的通用检测设计，采用染料法荧光定量RT-PCR技术，适用于科研领域对病毒核酸的定性和定量分析。产品具有高灵敏度、高特异性及操作简便等特点，检测下限可达数百拷贝/反应。

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒样本，无需额外优化反应体系。

高特异性：基于牛轮状病毒保守序列设计引物，避免与其他病毒交叉反应。

宽线性范围：定量检测时线性范围覆盖至少5个数量级。

一管式检测：减少开盖操作，降低污染风险。

兼容性：与常见病毒核酸提取试剂盒兼容。

包装规格

规格：50次20μL反应体系

主要成分：

2×qPCR预混液（含荧光染料）

专用模板稀释液

牛轮状病毒通用引物混合物

阳性对照（1×10^8 拷贝/μL）

实验流程

1. 样本准备

样本数量：若检测N个样本，需设置N+2个提取反应（含1个阳性对照和1个阴性对照）。

阳性对照：使用试剂盒提供的阳性对照（1×10^6 拷贝/μL）稀释至与样本体积一致。

阴性对照：以无菌水替代样本。

核酸提取：建议使用商业DNA/RNA提取试剂盒纯化样本。

2. PCR扩增

按说明书配制反应体系（20μL/反应），加入模板后进行荧光定量PCR。

推荐循环条件：

逆转录：50°C 15分钟

预变性：95°C 5分钟

扩增：95°C 15秒 → 60°C 1分钟（40循环）

3. 结果分析

定性检测：通过扩增曲线和Ct值判定阳性/阴性。

定量检测：根据标准曲线计算病毒拷贝数。

电泳验证（可选）：取5-10μL产物进行1.5%-2%琼脂糖凝胶电泳，预期条带约200bp。

注意事项

质量控制：若阴性对照出现扩增，表明存在污染，实验需重新进行。

用途限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

储存条件：-20°C避光保存，避免反复冻融。

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