罗布罗布芽生菌染料法荧光定量PCR试剂盒

罗布罗布芽生菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对罗布罗布芽生菌基因保守区域设计特异性引物。在扩增过程中，SYBR Green与双链DNA结合释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现核酸的定性和定量分析。

试剂组成

| 组分名称 | 规格 |

| 罗布罗布芽生菌扩增液 | 50 μL ×1管 |

| 罗布罗布芽生菌反应液 | 950 μL ×1管 |

| 阳性质控品 | 1管（浓度详见标签）|

| 阴性对照 | 1管（无核酸水） |

操作步骤

样本处理：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

反应体系配制（以50 μL为例）：

反应液：25 μL

扩增液：1 μL

模板DNA：2-5 μL

补足无核酸酶水至50 μL。

PCR程序设置：

预变性：95℃ 3 min；

扩增循环（40 cycles）：95℃ 15 s → 60℃ 30 s（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃递增。

性能参数

灵敏度：可检测低至10拷贝/μL的靶基因。

特异性：引物经BLAST验证，无交叉反应。

重复性：CV值≤5%。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免核酸污染。

熔解曲线需呈现单一峰形，杂峰提示非特异性扩增。

阳性质控品Ct值应在预期范围内，否则需排查试剂或仪器问题。

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