田鼠痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

田鼠痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

本试剂盒专用于田鼠痘病毒核酸的荧光定量PCR检测，适用于科研领域，不可用于临床诊断。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测病毒DNA模板。

高特异性：基于田鼠痘病毒保守序列设计引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式操作，避免扩增产物污染。

稳定可靠：提供预混反应体系，重复性好。

规格与成分

2×qPCR MagicMix：500 μL（棕色管，含荧光染料、dNTPs、耐热DNA聚合酶）。

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（黄盖）。

田鼠痘病毒引物混合物：100 μL（白盖，含特异性引物及探针）。

阳性对照（1×10^8拷贝/μL）：50 μL（红盖，非活体DNA片段）。

使用手册：1份。

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA模板（待测样本）。

10×ROX校正染料（依机型需求，参见仪器说明书）。

操作步骤

阳性对照稀释（10^2~10^7拷贝/μL梯度制备）

注意事项：在独立洁净区操作，避免污染试剂盒其他组分。

标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL模板稀释液。

梯度稀释：

7号管：加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀，得10^7拷贝/μL溶液。

依次转移5 μL至下一管，稀释至2号管（10^2拷贝/μL）。

稀释后所有管置于冰上备用。

PCR反应体系配制

按以下比例配制反应液（单次20 μL体系）：

2×qPCR MagicMix：10 μL

引物混合物：2 μL

模板DNA：2 μL（待测样本或阳性对照）

ROX（可选）：依机型添加

无核酸酶水：补至20 μL

短暂离心混匀，避免气泡。

荧光定量PCR程序

预变性：95℃ 3分钟。

循环步骤（40次）：

95℃ 15秒（变性）

60℃ 60秒（退火/延伸，采集荧光信号）

数据分析：使用仪器配套软件，以Ct值定量病毒拷贝数。

注意事项

所有操作需符合分子生物学实验室规范，防止交叉污染。

阳性对照为DNA片段，无生物传染风险，但仍需按有害物质处理。

反应体系分装建议使用带滤芯枪头。

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