泰勒氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

泰勒氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒为通用型染料法荧光定量PCR检测系统，适用于泰勒氏菌属（如马生殖泰勒氏菌、环形泰勒虫等）的核酸定性及定量分析。采用优化引物和探针设计，具有高灵敏度和特异性，可有效避免与其他病原体DNA/RNA的交叉反应。

产品组分

荧光PCR反应液：预混染料法Master Mix（含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等）

引物与探针：针对泰勒氏菌属高度保守区域设计

阳性对照：无传染性DNA片段（1×10^8拷贝/μL）

模板稀释液：用于标准曲线制备

DEPC-H₂O：无核酸酶水（部分版本提供）

操作步骤

样本DNA提取

使用兼容的核酸提取试剂盒提取待测样本DNA，建议在样本制备区操作。

标准曲线制备（样本制备区）

标记6支离心管为7至2号，分别加入45 μL模板稀释液（或DEPC-H₂O）。

取5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到1×10^7拷贝/μL的标准品。

依次梯度稀释至2号管（1×10^2拷贝/μL），每次稀释需更换枪头。

PCR反应体系配制（反应配制区）

按20μL体系配制：

荧光PCR反应液 10 μL

引物探针混合液 2 μL

模板DNA 2 μL

DEPC-H₂O 补至20 μL

荧光定量PCR程序

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：

95℃ 15秒

60℃ 30秒（采集荧光信号）

注意事项

分区操作：标准品稀释与样本处理需在独立区域进行，避免气溶胶污染。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（DEPC-H₂O）及标准曲线（R²≥0.99）。

适用范围：仅限科研用途，不可用于临床诊断。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

性能参数

灵敏度：最低检测限≤10拷贝/μL

线性范围：1×10^2~1×10^7拷贝/μL（R²≥0.99）

特异性：不与常见马属动物病原体交叉反应

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