人多瘤病毒6 染料法荧光定量PCR试剂盒

预期用途

本试剂盒用于体外定性或定量检测人样本中HPyV6病毒核酸，适用于科研用途（不可用于临床诊断）。其特点包括：

高特异性：引物针对HPyV6基因组保守区域设计，经生物信息学验证；

高灵敏度：最低检测限达10^3 copies/mL，优于常规PCR；

便捷性：预混反应体系（含SYBR Green染料及ROX参比染料），仅需添加模板；

防污染设计：一管式闭管操作，降低交叉污染风险。

检验原理

基于SYBR Green I荧光染料法，通过实时监测PCR扩增过程中荧光信号强度，定量分析HPyV6病毒载量。扩增曲线与标准品对比，实现绝对定量。

试剂组成

| 组分名称 | 规格 |

| HPyV6预混反应液 | 1 mL × 1管 |

| HPyV6特异性引物混合液 | 200 μL × 1管 |

| GAPDH内参引物（人源） | 200 μL × 1管 |

| HPyV6阳性质控品 | 50 μL × 1管 |

| 无核酸酶水 | 1 mL × 1管 |

| 说明书 | 1份 |

储存条件及有效期

-20℃避光保存，避免反复冻融（≤5次），有效期12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等）。

操作步骤

标准品制备：阳性质控品梯度稀释（10^7~10^1 copies/μL）建立标准曲线。

反应体系配制（20μL/反应）：

预混反应液 10 μL

引物混合液 1 μL

模板DNA/cDNA 2 μL

无核酸酶水 7 μL

PCR程序：

预变性：95℃ 3 min

扩增：95℃ 10 s → 60℃ 30 s（40循环，采集荧光）

熔解曲线分析：60℃~95℃（升温速率0.5℃/s）

质量控制

阳性质控品Ct值需≤30；

阴性质控品无扩增曲线；

熔解曲线为单一峰。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免核酸污染；

不同批号组分不可混用；

内参基因（GAPDH）用于监控提取及扩增效率。

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