水痘-带状疱疹病毒疫苗株染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，针对水痘-带状疱疹病毒疫苗株保守序列设计特异性引物及荧光探针，通过体外扩增检测病毒DNA，适用于临床样本的病原学诊断。

试剂盒组成

VZV反应液：含PCR缓冲体系及荧光探针

酶液：热启动Taq DNA聚合酶

阳性质控品：已知浓度的VZV DNA（1×10^8拷贝/μL）

阴性质控品：无核酸酶水

自备试剂：DNA模板、10×ROX（根据仪器型号选择）

包装规格：25T/盒或50T/盒

储存条件及有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤5次）。

运输：低温运输。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500

安捷伦 MX3000P/3005P

LightCycler系列

Bio-Rad、Eppendorf等

样本要求

适用样本：血清、疱疹液、口腔分泌物等。

样本处理：需自行提取DNA，建议使用兼容的核酸纯化试剂盒。

操作方法

标准曲线制备：

梯度稀释阳性质控品（1×10^8拷贝/μL）至6个浓度（10^7~10^2拷贝/μL）。

每管加入45 μL模板稀释液及5 μL稀释后阳性对照，震荡混匀。

PCR反应体系：

按20 μL/反应配制，含VZV反应液、酶液及待测DNA模板。

扩增程序：

预变性：95℃ 2分钟；

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40个循环）。

结果判读

定量分析：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算待测样本浓度。

定性分析：

阳性：Ct值≤35，且有典型扩增曲线；

阴性：Ct值≥40；

可疑（35<Ct<40）：需重复检测，重复后Ct<40判为阳性。

注意事项

不同批号试剂不可混用。

操作需在无菌环境下进行，避免交叉污染。

若用于疫苗株检测，需确认引物探针与疫苗株序列匹配。

性能参数

灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的病毒DNA。

特异性：与相关病毒无交叉反应。

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