FITC-Protein A，绿色荧光素标记蛋白A 新品

FITC-Protein A 绿色荧光素标记蛋白A

FITC-Protein A（绿色荧光素标记蛋白A）是将绿色荧光素（FITC）通过共价偶联技术标记到蛋白A（Protein A）分子上形成的荧光标记蛋白。蛋白A是一种从金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）中分离纯化的蛋白质，分子量约42 kDa，其*显著的特性是可特异性结合多种哺乳动物免疫球蛋白G（IgG）的Fc段，而不影响IgG的抗原结合活性，结合特异性高、亲和力强；FITC作为一种经典的绿色荧光探针，激发波长约490 nm，发射波长约520 nm，具有荧光量子产率高、光稳定性好、对生物分子构象影响小等特点。FITC-Protein A同时具备蛋白A的IgG特异性结合能力和FITC的绿色荧光示踪能力，是免疫检测、细胞成像、抗体纯化等领域的核心工具。

该标记蛋白的制备需采用温和的化学偶联方法，核心是在保留蛋白A与IgG结合活性的前提下，实现FITC的高效标记。常用的制备方法为异硫氰酸酯法，具体步骤如下：首先将蛋白A溶解于pH 7.2-7.8的PBS缓冲液中，确保蛋白处于稳定的天然构象，该构象是蛋白A维持Fc段结合活性的关键；将FITC溶解于少量无水DMSO中，缓慢滴加到蛋白A溶液中，控制FITC与蛋白A的摩尔比在5:1-15:1之间，摩尔比的选择需平衡荧光标记率和蛋白A活性，通常理想标记率为每个蛋白A分子结合3-6个FITC分子；在室温、避光条件下搅拌反应1.5-2.5小时，期间FITC的异硫氰酸酯基团与蛋白A分子赖氨酸残基上的氨基发生亲核加成反应，形成稳定的硫脲键；反应完成后，采用凝胶过滤层析（如Sephadex G-50层析柱）进行纯化，该方法可有效分离标记蛋白与游离的FITC染料和DMSO，避免游离染料对后续实验产生荧光干扰；纯化后需进行全面的质量表征：通过SDS-PAGE验证蛋白纯度（纯度≥95%），利用荧光分光光度计测定荧光强度、激发/发射波长及FITC标记率，采用ELISA法或免疫印迹法检测蛋白A与IgG的结合活性，确保标记后蛋白A的IgG结合活性保留率≥90%，荧光信号稳定、可重复。

FITC-Protein A凭借其IgG特异性结合能力和绿色荧光示踪特性，在免疫检测、细胞生物学研究、抗体纯化、生物成像等领域具有广泛且重要的应用。在免疫检测领域，是免疫荧光染色、免疫组化、流式细胞术、荧光免疫分析等方法的核心探针，可特异性结合样本中的IgG抗体，通过FITC的绿色荧光信号实现对目标抗原或抗体的定位与定量，例如在免疫组化中，可用于检测组织切片中的特异性抗原，通过荧光显微镜观察荧光信号分布，实现抗原的精准定位；在细胞生物学研究中，可用于细胞表面IgG受体的定位与表达量分析，通过绿色荧光信号实时观察受体的分布、内化过程，以及受体与配体的相互作用；在抗体纯化领域，可将FITC-Protein A固定于层析柱填料上，利用其与IgG的特异性结合实现抗体的高效纯化，同时可通过荧光信号监测纯化过程中抗体的结合与洗脱情况，提高纯化效率；在生物成像领域，可与其他荧光探针联合使用进行多色成像，例如与罗丹明标记的二抗联合，实现对目标分子的双重验证，提高实验结果的可靠性；此外，还可用于免疫沉淀、病毒检测、自身免疫性疾病诊断等场景。相较于未标记的蛋白A，FITC-Protein A无需额外标记即可实现可视化检测，简化了实验操作流程，提高了检测的灵敏度和直观性，是生命科学研究中应用*广泛的荧光免疫工具之一。

用途：科研

包装：瓶装

产地：西安瑞禧生物科技有限公司  

关于我们：

西安瑞禧生物科技有限公司是一家专注于新型功能材料与生物试剂研发、生产及销售的科技型企业。公司产品涵盖纳米材料、荧光微球、高分子材料、功能性修饰载体以及相关定制化服务，广泛应用于生物医学研究、体外诊断、药物递送、材料科学等领域。瑞禧生物依托技术团队和实验平台，能够为科研机构与企业提供产品和个性化解决方案。公司始终坚持“创新驱动，品质为先”的理念，致力于推动科研与产业应用的融合发展，为客户提供专业、稳定和可靠的材料支持与技术服务。 

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