Streptavidin-FITC，绿色荧光素标记链霉亲和素

Streptavidin-FITC：绿色荧光素标记链霉亲和素

Streptavidin-FITC即绿色荧光素（FITC）标记的链霉亲和素，是通过共价偶联将FITC与链霉亲和素结合形成的荧光功能蛋白。链霉亲和素是从链霉菌中提取的四聚体蛋白，对生物素具有*高的亲和力和特异性，且分子量小、免疫原性低、生物相容性好，是生物素-亲和素系统的核心组件；FITC作为经典绿色荧光染料，激发波长约490-495nm，发射波长约515-520nm，荧光量子产率高、光学性能稳定，两者结合后形成的Streptavidin-FITC，兼具特异性亲和结合能力和荧光示踪功能，是生物医学研究中信号放大和靶向示踪的重要工具。

该标记物的制备采用N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS）活化法，核心是在保留链霉亲和素生物素结合活性的前提下实现高效偶联。首先对FITC进行活化，引入NHS活性基团生成FITC-NHS酯；随后将其与链霉亲和素溶液混合，在温和条件下，FITC-NHS酯中的NHS基团与链霉亲和素分子上的游离氨基发生酰胺化反应，形成稳定共价键。反应过程需严格控制条件：反应体系pH值调节至7.0-7.5，模拟生理环境保护链霉亲和素活性；反应温度控制在4℃，减少FITC荧光淬灭；精准调节FITC与链霉亲和素的摩尔比（通常为3-6:1），确保每个链霉亲和素分子结合适量FITC——标记率过高可能影响链霉亲和素的四聚体结构，降低生物素结合能力；标记率过低则荧光信号不足。反应完成后，通过凝胶过滤层析（如Sephadex G-25）纯化，去除未结合的游离FITC，获得高纯度Streptavidin-FITC产物。

Streptavidin-FITC凭借生物素-亲和素系统的高特异性和FITC的优良荧光特性，广泛应用于免疫荧光检测、细胞成像、蛋白定位等领域。在免疫荧光分析中，可作为二抗放大试剂，与生物素化一抗特异性结合，通过FITC的绿色荧光实现目标抗原的定位和检测，如肿瘤标志物的细胞定位、组织切片中蛋白的分布分析；在细胞成像领域，可与生物素化的细胞表面标志物结合，实时追踪细胞的迁移、增殖过程，为细胞生物学研究提供直观数据；在核酸检测领域，可用于荧光原位杂交（FISH）实验，与生物素化探针结合，实现目标基因的定位和表达分析；此外，还可用于生物传感器构建，作为信号报告分子提高检测的灵敏度和特异性，适用于多种生物标志物的高灵敏检测。

使用Streptavidin-FITC时需注意以下事项：一是储存条件，需避光、密封置于-20℃低温环境保存，避免与氧化剂接触，建议分装储存避免反复冻融，防止荧光淬灭和蛋白变性；二是检测参数调节，使用匹配的荧光检测设备，调整激发光（490-495nm）和发射光（515-520nm）波长，确保高效捕捉荧光信号；三是避免非特异性结合，实验前需进行封闭处理，减少蛋白非特异性吸附；四是荧光保护，检测过程中避免强光直射，体外实验可添加绿色荧光抗淬灭剂（如甘油、DABCO）延长信号寿命；五是纯度验证，使用前通过凝胶电泳或HPLC验证纯度，确保无游离FITC污染；六是活性验证，可通过与生物素化蛋白的结合实验验证其亲和活性。

用途：科研

包装：瓶装

产地：西安瑞禧生物科技有限公司  

关于我们：

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