线粒体呼吸链复合物IV测定试剂盒/20样

线粒体呼吸链复合物IV测定试剂盒/20样

测定原理：

线粒体呼吸链复合物 IV  （ Mitochondria Complex IV），又称为细胞色素 C 氧化还原酶（ cytochrome c oxidoreductase）或细胞色素 C 氧化酶（Cytochrome c oxidase），存在于真核生物的细胞线粒体上，主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量。呼吸链复合物 IV 是由 13 种不同的亚体构成的复合物，其中含有 2 个血红素（heme）基团（a 和 a3）和 2 个铜原子，作为辅基（prosthetic groups）。

自备仪器用品：

比色皿、培养箱、1.5毫升离心管。

实验步骤：
（一）、背景对照测定

1、移取 800  微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿。

2、加入 100  微升稀释液（Reagent C）。

3、上下倾倒数次，混匀。

4、室温静置 3  分钟。

5、加入 100  微升含有反应液（Reagent B）和稳定液（Reagent D）的工作液。

6、上下倾倒数次，混匀（限定在 3  秒之内）。

7、即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：（0  秒读数－60  秒读数），正常读数差值为 0.001 至 0.005。

（二）、样品活性测定

1、移取 800  微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿。

2、加入 100  微升待测样品（注意：建议总量 2  微克线粒体蛋白）。

3、上下倾倒数次，混匀。

4、室温静置 3  分钟。

5、加入 100  微升含有反应液（Reagent B）和稳定液（Reagent D）的工作液。

6、上下倾倒数次，混匀（限定在 3  秒之内）。

7、即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：（0  秒读数－60  秒读数），正常读数差值为正值。