氨基酸(AA)含量测定试剂盒/分光光度法/48样

氨基酸(AA)含量测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。另外，氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。

测定原理：

氨基酸的 α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在 570 nm有特征吸收峰；通过测定 570 nm 吸光度，来计算氨基酸含量。

自备仪器及用品：

台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、无水乙醇、冰和蒸馏水。

LAP 测定步骤：
1. 分光光度计预热 30 min ，调节波长到 570 nm，蒸馏水调零。

2. 空白管：取 EP 管，加入 50μL 蒸馏水，500μL 试剂二，500μL 试剂三和 50μL 试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温 15 min，冷却后反复颠倒 EP 管数次，于 570nm 测定吸光值，记为 A空白管。显色后务必在 30min 内测完。

3. 标准管：取 EP 管，加入 50μL 标准品，500μL 试剂二，500μL 试剂三和 50μL 试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温 15 min，冷却后反复颠倒 EP 管数次，于 570nm 测定吸光值，记为 A标准管。显色后务必在 30min 内测完。

4. 测定管：取 EP 管，加入 50μL 上清液，500μL 试剂二，500μL 试剂三和 50μL 试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温 15 min，冷却后反复颠倒 EP 管数次，于 570nm 测定吸光值，记为 A测定管。显色后务必在 30min 内测完。

注 意：

空白管和标准管只需要测定一次。