氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测定试剂盒/微量法/96S 新品

氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

GSH/GSSG 是细胞内最重要的氧化还原对之一。因此，测定细胞内 GSH 和GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态，也是谷胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。

测定原理：

利用 2-VP 法测GSSG 含量。

自备仪器和用品：

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸馏水。

GSSG 含量测定：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min ，调节波长到 412nm，蒸馏水调零。

2. 试剂三置于 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）水浴中保温 30min。

3. 取 1 mL EP 管，加入 100μ L 上清液，5 μ L 试剂二，盖紧后混匀，得混合液，置于 37℃水浴 30min；取 21μ L 混合液于 96 孔板，然后依次加入 20 μ L 试剂四、2 μ L 试剂五和 140 μ L 试剂六，迅速混匀后，测定 30 s和 150 s 光吸收 A1 和 A2，计算ΔA=A2-A1。

注 意：
1. 提取过程中去掉蛋白质，所以提取液不能用于测定蛋白含量。

2. 临用前配制的试剂配好后 4℃保存，2 天内使用完毕。

3. 最低检出限为 0.1 μmol/L。

4. 反应温度严格来说，为保证重复性，应在 25℃下进行反应。

5. 反应时间需精确控制，否则会影响反应速率计算，产生较大误差。

6. 样品中的 GSSG 浓度尽可能低一些，否则反应速率太大，没法控制，所以稀释倍数要尽量大些。。