γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)测定试剂盒/分光光度法/48样 新品

γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

γ-GT 是 γ-谷氨酰循环中的关键酶，催化 GSH 降解。γ-GT 催化 GSH 或者其他 γ-谷氨酰基化合物上的 γ-谷氨酰基转移到受体。也可以催化 GSH 和其他 γ-谷氨酰基化合物的水解，产生谷氨酸盐，在细胞外谷胱甘肽新陈代谢中起了重要的作。

测定原理：

γ-GT 催化谷氨酰对硝基苯胺中 γ-谷氨酰基转移给 N-甘氨酰甘氨酸，生成对硝基苯胺，在 405nm 有特征光吸收；通过测定 405nm 光吸收增加速率，来计算 γ-GT 酶活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

γ-GT 测定操作：
1. 分光光度计预热 30min ，调节波长到 405 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二置于 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）水浴中预热 30min（保证无沉淀）。

3. 测定管：取 1mL 玻璃比色皿，依次加入 100μL 上清液，900μL 工作液，混匀后于 405nm 测定 10 s 和 70 s 时吸光度，记为 A1 和 A2。

注 意：

1、培养细胞中 γ-GT 活性测定时，细胞数目须在 300 万-500 万之间，细胞中 γ-GT 的提取时可加试剂一后研磨或超声波处理，不能用细胞裂解液处理细胞（防止因为蛋白质变性导致酶失活）。

2、配置好的工作液 2 周内使用完毕。