人白血病抑制因子(LIF)elisa试剂盒

一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗LIF单抗（如小鼠IgG1），靶向LIF的受体结合域（检测范围15.6–1000 pg/mL）。

信号放大：生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统，搭配超敏化学发光底物（灵敏度达4 pg/mL）。

抗干扰设计：含IL-6家族细胞因子阻断剂（如OSM/CNTF阻断肽），交叉反应率＜0.5%。

 动态范围优化

覆盖生理水平（健康人血清＜10 pg/mL）至病理浓度（如骨髓增生异常综合征患者＞200 pg/mL）。

二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗LIF（氨基酸残基50-180）抗体固定化（批间差＜6%）

标准品  重组人LIF（0、15.6、62.5、250、500、1000 pg/mL，含0.1% BSA冻干保护剂）

适用样本  血清（首选）、血浆（肝素抗凝）、细胞上清（需离心去除碎片）

特殊添加剂  含0.05% Proclin 300防腐剂，2–8℃保存有效期18个月

三、临床应用与科研价值

血液疾病研究

白血病：LIF通过JAK-STAT通路促进白血病干细胞自我更新（AML患者血清LIF＞150 pg/mL提示预后不良）。

骨髓衰竭：再生障碍性贫血患者LIF水平与造血功能抑制相关。

干细胞与再生医学

维持胚胎干细胞多能性的关键因子（检测可评估干细胞状态）。

神经保护作用

在多发性硬化症模型中，LIF通过抑制Th17细胞分化减轻神经炎症。

四、操作规范与质控要点

样本处理

避免反复冻融（LIF易形成二聚体），采集后1小时内离心（4℃，3000×g）。

细胞上清需浓缩10倍（超滤离心）以提高检测灵敏度。

实验关键

温育条件：37℃避光45分钟，洗涤液需含0.1% Tween-20（pH 7.2–7.6）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.98）、高/低值质控（CV＜8%）。

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五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测天然与重组LIF单体  无法区分LIF与LIF受体复合物

特异性  与IL-6/OSM交叉反应＜0.5%  高脂血样本需超速离心（＞5000×g）

通量  适配全自动平台  组织样本需优化裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂）