人白介素15(IL-15)elisa试剂盒

1. 概述

白介素15（IL-15）**是γc家族细胞因子（分子量14-15kDa），主要由单核细胞和上皮细胞产生，通过IL-2Rβ/γc受体激活NK细胞和记忆性CD8? T细胞。作为免疫治疗的关键靶点，其检测对肿瘤免疫、自身免疫病和感染免疫研究具有重要意义。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高灵敏度化学发光法）：

捕获抗体：预包被抗IL-15单抗（克隆34559）特异性结合IL-15

检测抗体：生物素化抗IL-15单抗（克隆68904）识别不同表位

信号放大：链霉亲和素-碱性磷酸酶（SA-ALP）催化CSPD发光

检测：发光强度（RLU）与IL-15浓度正相关（检测范围：0.1-100 pg/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  低吸附表面处理

IL-15标准品  0.1-100 pg/mL  -20℃  WHO标准（NIBSC 95/554）溯源

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  无载体蛋白

SA-ALP  100 μL  2-8℃  RZ>3.5

化学发光底物  10 mL  2-8℃（避光）  动态范围10?

细胞刺激剂  5 mL  -20℃  含PMA/离子霉素

4. 样本要求

适用样本：

血清（推荐分离后立即检测）

血浆（EDTA抗凝，避免肝素）

肿瘤组织匀浆（需超声裂解）

NK细胞培养上清（无血清培养基）

特殊处理：

避免反复冻融（IL-15易降解）

高脂血样本需超滤（TG>300 mg/dL）

稳定性：

4℃保存≤24h（需加蛋白酶抑制剂）

-80℃分装冻存≤3个月

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5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL含1% BSA的PBS复溶

8点梯度稀释（0.1、0.5、2、5、10、25、50、100 pg/mL）

关键步骤：

加样体积：25μL样本+75μL稀释液

一抗孵育：4℃过夜（提高灵敏度）

化学发光读数：积分时间100ms/孔

质控要求：

空白孔RLU值<500

健康人血清质控（<5 pg/mL）

淋巴瘤患者阳性对照（>50 pg/mL）