人酸性成纤维生长因子(FGF-acidic)elisa试剂盒

                                             人酸性成纤维生长因子(FGF-acidic)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗FGF1单抗（如小鼠IgG1），靶向FGF1的肝素结合域（检测范围20–2000 pg/mL）。

信号放大：HRP标记的二抗与增强型TMB显色联用（灵敏度达5 pg/mL），可检测游离及肝素结合态FGF1。

抗干扰设计：含肝素钠（0.1 U/mL）稳定FGF1活性，降低与FGF2/FGF7的交叉反应（＜0.5%）。

动态范围优化

覆盖生理水平（健康人血清＜50 pg/mL）至病理浓度（如心肌缺血损伤后＞500 pg/mL）。

 二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗FGF1（140-155）表位抗体固定化（批间差＜8%）

标准品  重组人FGF1（0、20、100、400、1000、2000 pg/mL，含10%甘油冻存保护剂）

适用样本  血清（避免溶血）、血浆（肝素抗凝）、组织匀浆（需含1% Triton X-100裂解）

特殊添加剂  含1 mM DTT（维持FGF1还原状态），2–8℃保存有效期12个月

三、临床应用与科研价值

组织修复研究

缺血性疾病：心肌梗死患者血清FGF1升高（＞300 pg/mL）提示血管新生激活。

创伤修复：创面渗出液中FGF1水平与上皮再生速度正相关。

肿瘤微环境调控

FGF1通过FGFR1受体促进乳腺癌细胞侵袭（联合VEGF检测可评估预后）。

神经系统保护

脑缺血模型中FGF1通过PI3K/AKT通路减少神经元凋亡。

四、操作规范与质控要点

样本处理

组织样本需液氮速冻，裂解缓冲液含10 mM EDTA（抑制金属蛋白酶降解）。

避免使用EDTA抗凝血浆（可能螯合FGF1活性所需的Ca2?）。

实验关键

温育条件：37℃避光1小时，显色时间严格控时（10分钟±1分钟）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜10%）。

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五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测低至5 pg/mL的FGF1  无法区分内源性FGF1与重组治疗药物

特异性  与FGF2/FGF7交叉反应＜0.5%  样本需快速处理（FGF1半衰期＜30分钟）

通量  适配高通量检测（如自动化工作站）  高脂血样本需超速离心（＞10,000×g）