人趋化因子CCL18(CCL18)elisa试剂盒

                                             人趋化因子CCL18(CCL18)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗CCL18单抗（如小鼠IgG1），靶向CCL18的N端表位（检测范围8–500 pg/mL）。

信号放大：生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统，搭配超敏TMB显色（灵敏度达2 pg/mL）。

抗干扰设计：含CC类趋化因子阻断剂（如CCL2/CCL3阻断肽），交叉反应率＜0.5%。

动态范围优化

覆盖生理水平（健康人血清10–50 pg/mL）至病理浓度（如特发性肺纤维化患者BALF中＞200 pg/mL）。

二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗CCL18单抗固定化（批间差＜7%，可拆分使用）

标准品  重组人CCL18（0、8、32、125、250、500 pg/mL，冻干粉含0.1% HSA稳定剂）

适用样本  血清（首选）、血浆（肝素抗凝）、支气管肺泡灌洗液（BALF，需离心澄清）

特殊添加剂  含0.05% Proclin 300防腐剂，2–8℃保存有效期18个月

三、临床应用与科研价值

纤维化疾病诊断

肺纤维化：BALF中CCL18＞150 pg/mL提示疾病活动度（敏感性82%，特异性91%）。

肝纤维化：与肝星状细胞激活相关，联合TIMP-1检测可提高诊断准确性。

肿瘤微环境研究

乳腺癌、卵巢癌组织中CCL18通过CCR8受体招募调节性T细胞（Treg），促进免疫逃逸。

自身免疫病监测

类风湿关节炎滑液中CCL18水平与关节破坏评分正相关。

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 四、操作规范与质控要点

样本处理

BALF样本需加入蛋白酶抑制剂（如1 mM PMSF），避免反复冻融。

血清/血浆采集后2小时内离心（4℃，1000×g，10分钟）。

实验关键

温育条件：37℃避光1小时，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜10%）。

五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测CCL18单体及寡聚体形式  无法区分CCL18不同糖基化修饰亚型

特异性  与CCL3/CCL5交叉反应＜0.3%  高脂血样本需超速离心（＞5000×g）

通量  适配全自动平台  组织样本需优化裂解缓冲液