人脑钠肽(BNP)elisa试剂盒

概述 

人脑钠肽（Brain Natriuretic Peptide, BNP）是一种由心室肌细胞分泌的心脏激素，在心力衰竭诊断、预后评估和疗效监测中具有重要临床价值。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，专用于定量检测人血清或血浆中的BNP水平，适用于心血管疾病的实验室诊断和科研分析。

 1. 检测原理（双抗体夹心ELISA）

预包被捕获抗体：微孔板包被抗人BNP单克隆抗体（针对BNP活性片段）。

样本结合：BNP与捕获抗体特异性结合。

检测抗体孵育：加入HRP标记的抗BNP二抗（识别BNP另一端表位）。

信号放大与显色：TMB底物经HRP催化显色（蓝色→黄色）。

定量分析：450nm测OD值，BNP浓度与吸光度成正比。

2. 试剂盒组成

组分  说明

预包被微孔板  96孔（可拆卸），包被抗BNP单抗（如靶向BNP 1-32片段）。

BNP标准品  合成人BNP肽段（0、20、50、100、200、500、1000 pg/mL）。

酶标抗体  HRP标记的抗BNP二抗（克隆#BC203）。

TMB显色液  避光保存，使用前平衡至室温。

终止液  2M H?SO?。

洗涤缓冲液  25×浓缩液（含ProClin 300防腐剂）。

样本稀释液  含BSA的Tris缓冲液，减少基质干扰。

3. 适用样本及处理

血清：静置凝固后离心（1500×g, 15min），避免溶血。

血浆（EDTA抗凝）：采集后30分钟内离心（1000×g, 10min）。

稳定性：

室温（25℃）：≤4小时

2-8℃：≤24小时

-20℃：≤3个月（避免反复冻融＞3次）

4. 操作步骤（简化流程）

加样：标准品/样本（100μL/孔）→ 37℃孵育45分钟。

洗涤：自动洗板机洗5次（或手动注满洗涤液静置30秒后拍干）。

加酶标抗体：100μL/孔 → 37℃孵育30分钟。

显色：加TMB（90μL/孔）→ 避光反应15分钟。

终止：加终止液（50μL/孔）。

检测：450nm主波长，630nm参比波长读值。

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 5. 关键性能参数

参数  指标

检测范围  5–1000 pg/mL（覆盖临床相关浓度）

灵敏度  1.5 pg/mL（最低检出限）

精密度  板内CV <5%，板间CV <8%

特异性  不与ANP、CNP交叉反应（交叉率<0.01%）

Hook效应  线性范围至5000 pg/mL（无需稀释）