人内皮素(Endothelin)elisa试剂盒

                                             人内皮素(Endothelin)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗ET-1单抗（如小鼠IgG），特异性结合ET-1（检测范围0.5–200 pg/mL），可区分ET-1、ET-2、ET-3亚型（交叉反应率＜5%）。

信号放大：HRP标记的二抗与化学发光底物联用，灵敏度达0.2 pg/mL，满足超微量检测需求。

抗干扰设计：含EDTA（抑制金属蛋白酶降解ET）和ET受体阻断剂（如BQ123），提高准确性。

动态范围优化

覆盖生理水平（健康人血浆＜5 pg/mL）至病理浓度（如肺动脉高压患者＞50 pg/mL）。

 二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗ET-1（15-21）表位抗体固定化（批间差＜6%）

标准品  合成人ET-1（0、1、5、20、50、100、200 pg/mL，含0.1% BSA稳定剂）

适用样本  血浆（EDTA抗凝，需抑肽酶预处理）、组织匀浆（含蛋白酶抑制剂）

特殊添加剂  含0.01% Thimerosal防腐剂，2–8℃保存有效期24个月

三、临床应用与科研价值

心血管疾病诊断

肺动脉高压：血浆ET-1＞25 pg/mL提示内皮功能紊乱，与预后显著相关。

动脉粥样硬化：血管局部ET-1过表达促进血管收缩与炎症。

肾脏疾病监测

慢性肾病（CKD）患者ET-1水平与肾纤维化程度正相关。

肿瘤研究

ET-1通过ETAR受体促进卵巢癌、前列腺癌的转移（靶向药物疗效评估）。

四、操作规范与质控要点

样本处理

血浆采集后需立即加入抑肽酶（1000 KIU/mL），冰浴离心（4℃，3000×g，10分钟）。

组织样本需液氮速冻，裂解缓冲液含1% Triton X-100。

实验关键

温育条件：37℃避光45分钟，严格控时（±3分钟）。

洗涤液需含0.1% Tween-20（降低非特异性结合）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（回收率90–110%）。

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五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测ET-1活性形式（1-21）  无法区分ET-1与Big ET-1（前体）

特异性  与ET-2/ET-3交叉反应＜5%  样本需快速处理（ET-1半衰期＜2分钟）

通量  适配高通量筛查（如自动化工作站）  溶血样本需排除（红细胞释放干扰因子）