人血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM1)elisa试剂盒

1. 概述

**血管内皮细胞粘附分子-1（Vascular Cell Adhesion Molecule-1, VCAM-1/CD106）**是免疫球蛋白超家族成员（分子量110kDa），由激活的内皮细胞表达，通过与VLA-4（α4β1整合素）结合介导白细胞跨内皮迁移。其可溶性形式（sVCAM-1）是血管炎症、动脉粥样硬化和肿瘤转移的重要标志物。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高灵敏度化学发光法）：

捕获抗体：预包被抗VCAM-1单抗（克隆1.G11B1）特异性结合sVCAM-1

检测抗体：生物素化抗VCAM-1单抗（克隆1.4C3）识别不同表位

信号放大：链霉亲和素-碱性磷酸酶（SA-ALP）催化CSPD发光底物

检测：化学发光强度（RLU）与sVCAM-1浓度成正比

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃（含干燥剂）  特殊亲水处理板

sVCAM-1标准品  0.5-200 ng/mL  -20℃  WHO标准品（NIBSC 91/542）溯源

生物素化抗体  120 μL  -20℃（避光）  无载体蛋白配方

SA-ALP  120 μL  2-8℃  高纯度（≥95%）

CSPD发光底物  12 mL  2-8℃（避光）  超敏型（检测限0.1 ng/mL）

洗涤缓冲液（25×）  30 mL  室温  含表面活性剂改良配方

内皮细胞裂解液  10 mL  -20℃  含磷酸酶抑制剂

4. 样本要求

适用样本：

血清（推荐空腹采血）

血浆（EDTA抗凝，避免肝素）

动脉粥样硬化斑块匀浆

肿瘤组织裂解液

特殊处理：

溶血样本（Hb>0.5 g/dL）需超滤处理

高脂血样本（TG>500 mg/dL）建议稀释检测

细胞培养上清需去除外泌体（100,000g离心1h）

稳定性：

4℃保存≤72小时

-80℃可保存1年（避免反复冻融>3次）

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5 mL去离子水复溶

8点梯度稀释（0.5、1、5、10、25、50、100、200 ng/mL）

关键步骤：

加样体积：50 μL样本+50 μL稀释液

一抗孵育：37℃振荡（150 rpm）2小时

化学发光读数：酶标仪积分时间200 ms/孔

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