人基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP-1)elisa试剂盒

一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗TIMP-1单抗（如小鼠IgG2a），特异性结合TIMP-1（检测范围0.2–50 ng/mL）。

信号放大：HRP或链霉亲和素标记的二抗与TMB显色联用，灵敏度达0.1 ng/mL，可检测微量TIMP-1。

抗干扰设计：含金属离子螯合剂（EDTA），防止MMP-9介导的TIMP-1降解。

动态范围优化

覆盖生理水平（健康人血清50–150 ng/mL）至病理浓度（如肝纤维化患者＞300 ng/mL）。

 二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗TIMP-1抗体固定化（批间差＜8%）

标准品  重组人TIMP-1（0、0.5、2、5、10、20、50 ng/mL）

适用样本  血清（首选）、血浆（EDTA抗凝）、细胞上清、组织匀浆（需含蛋白酶抑制剂）

特殊添加剂  ，2–8℃保存有效期24个月

三、临床应用与科研价值

纤维化疾病监测

肝纤维化：TIMP-1/MMP-9比值＞1提示纤维化进展（联合FibroTest评估）。

肺纤维化：BALF中TIMP-1升高与肺功能下降相关。

肿瘤预后评估

乳腺癌、结直肠癌患者血清TIMP-1水平与转移风险正相关（＞200 ng/mL提示不良预后）。

心血管疾病

动脉粥样硬化斑块中TIMP-1过表达与斑块稳定性相关。

四、操作规范与质控要点

样本处理

避免使用肝素抗凝血浆（干扰金属离子依赖性结合）。

组织样本需液氮速冻后裂解（防止蛋白降解）。

实验关键

温育条件：37℃避光1小时，洗涤液需含0.1% Tween-20。

质控标准

每板需含标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜10%）。

五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测游离TIMP-1及MMP-9/TIMP-1复合物  无法区分TIMP-1不同糖基化形式

特异性  与TIMP-2/3/4交叉反应＜0.5%  样本需快速处理（室温下易与MMPs结合）

通量  适配高通量检测（如自动化工作站）  高脂血样本需超速离心

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