人肾损伤因子1(TIM-1)elisa试剂盒

                                             人肾损伤因子1(TIM-1)elisa试剂盒
1. 检测原理（双抗体夹心ELISA）

预包被捕获抗体：微孔板包抗人TIM-1单克隆抗体。

样本结合：TIM-1蛋白与捕获抗体特异性结合。

检测抗体孵育：加入生物素或HRP标记的二抗，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

信号放大与显色：链霉亲和素-HRP（若为生物素系统）催化TMB显色（蓝色→黄色）。

定量分析：450nm测OD值，TIM-1浓度与吸光度成正比。

 2. 试剂盒组成
 

组分  说明

预包被微孔板  96孔（可拆卸），包被抗TIM-1单抗。

TIM-1标准品  重组人TIM-1蛋白（0、0.156、0.313、0.625、1.25、2.5、5、10 ng/mL）。

检测抗体  生物素或HRP标记的抗TIM-1二抗。

TMB显色液  避光保存，现用现配。

终止液  1M H?SO?。

洗涤缓冲液  20×浓缩PBS-Tween 20，需稀释使用。

样本稀释液  适用于高浓度尿液或血清样本。

3. 适用样本及处理
 

尿液（首选）：晨尿中TIM-1稳定性高，离心（2000×g, 10min）去除沉淀。

血清/血浆（EDTA抗凝）：避免溶血，离心后分装保存。

组织匀浆（肾组织）：裂解后离心取上清，调整总蛋白浓度至1-2 mg/mL。

稳定性：2-8℃保存≤48小时，长期储存需-80℃（避免反复冻融）。

4. 操作步骤（简化版）
 

加样：标准品/样本加入微孔板 → 37℃孵育1小时。

洗涤：洗板3次，去除未结合物。

加检测抗体：孵育1小时（37℃）。

信号放大（若适用）：加链霉亲和素-HRP，孵育30分钟。

显色：加TMB → 避光反应15分钟。

终止与检测：加终止液，450nm读值（参考630nm）。

公司正在出售的产品：

 5. 关键性能参数

参数  指标

检测范围  0.156–10 ng/mL（尿液可稀释至50倍）

灵敏度  ≤0.05 ng/mL

精密度  板内CV <6%，板间CV <10%

特异性  不与TIM-3、TIM-4等其他TIM家族蛋白交叉

回收率  85–115%（尿液/血清验证）