人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa试剂盒

1. 概述

转化生长因子β1（Transforming Growth Factor-β1, TGF-β1）是多功能细胞因子（分子量25kDa），以前体形式分泌，经蛋白酶激活后发挥生物学作用。作为纤维化、肿瘤免疫调控和胚胎发育的关键介质，其检测对器官纤维化、癌症预后评估及免疫调节研究具有重要意义。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（活性/潜在型可选）：

预包被抗LAP抗体（克隆27235）捕获潜在型TGF-β1

酸激活（pH3.0处理）后检测总TGF-β1

生物素化抗active TGF-β1抗体（克隆9016）识别活性形式

链霉亲和素-HRP系统信号放大（化学发光/比色法可选）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  特殊亲水处理

TGF-β1标准品  4-500 pg/mL  -20℃  含重组人TGF-β1活性蛋白

酸激活试剂  10 mL  室温  pH3.0甘氨酸-HCl缓冲液

中和缓冲液  10 mL  室温  pH7.4 PBS

生物素化抗体  120 μL  -20℃（避光）  识别活性表位

化学发光底物  12 mL  2-8℃（避光）  动态范围10?

4. 样本要求

适用样本：

血清/血浆（EDTA抗凝，避免肝素）

组织裂解液（含1% Triton X-100）

细胞培养上清（无血清培养基）

支气管肺泡灌洗液（BALF）

特殊处理：

检测活性TGF-β1：直接检测（无需激活）

检测总TGF-β1：酸激活（pH3.0，10min）+中和

血小板去除（3000g×15min，防血小板释放干扰）

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL 4mM HCl+0.1% BSA复溶

8点梯度稀释（4、8、16、31、63、125、250、500 pg/mL）

关键步骤：

酸激活：样本与激活试剂1:1混合，室温10min

中和：加入等体积中和缓冲液

检测限：化学发光法达0.5 pg/mL（比色法2 pg/mL）

质控要求：

每板包含：

非激活对照（检测内源性活性TGF-β1）

酸激活对照（检测总TGF-β1）

健康人血清质控（活性型：5-30 pg/mL；总TGF-β1：2-10 ng/mL）

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