人血小板衍生生长因子受体α(PDGFRA)elisa试剂盒

1. 检测原理

通常采用 双抗体夹心ELISA法（Sandwich ELISA）：

捕获抗体：预包被在微孔板上的抗PDGFRA抗体，特异性结合样本中的PDGFRA。

检测抗体：生物素或HRP标记的二抗，与PDGFRA的另一表位结合，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

信号放大：加入链霉亲和素-HRP（若为生物素系统）或直接显色底物（如TMB），酶催化反应产生颜色，颜色深浅与PDGFRA浓度成正比。

读数：450nm波长测OD值，通过标准曲线计算浓度。

2. 主要组成

预包被微孔板：96孔板（抗PDGFRA单抗包被）。

标准品：重组人PDGFRA蛋白（浓度梯度如0、31.25、62.5、125、250、500、1000 pg/mL）。

检测抗体：生物素或HRP标记的抗PDGFRA二抗。

显色系统：TMB底物 + 终止液（2M H?SO?）。

洗涤缓冲液（PBS或TBS含0.05% Tween-20）。

样本稀释液（含蛋白稳定剂，减少非特异性结合）。

 3. 样本要求

血清/血浆：建议EDTA抗凝，避免溶血（血红蛋白可能干扰）。

细胞上清：离心去除碎片，-80℃分装保存。

组织匀浆：裂解后离心取上清，蛋白浓度建议调整至1-10 mg/mL。

稳定性：2-8℃保存24小时，长期需-20℃/-80℃。

4. 操作步骤（简版）

加样：标准品/样本加入微孔板，孵育1-2小时（37℃）。

洗涤：洗板3-5次，去除未结合物。

加检测抗体：孵育1小时（37℃）。

信号放大：加链霉亲和素-HRP（若适用），孵育30分钟。

显色：加TMB避光反应10-15分钟。

终止 & 检测：加终止液，450nm读值（参考630nm）。

5. 技术参数

灵敏度：通常<10 pg/mL（高灵敏度试剂盒可达1 pg/mL）。

检测范围：15.6-1000 pg/mL（覆盖生理及病理浓度）。

特异性：不与PDGFRβ、VEGFR等其他酪氨酸激酶受体交叉反应。

精密度：板内CV <8%，板间CV <12%。

回收率：85-115%（验证样本基质效应）。

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