人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)elisa试剂盒

一、基本概述

1. 检测目标

PCSK9（Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9）是一种由肝脏合成的丝氨酸蛋白酶，主要通过降解低密度脂蛋白受体（LDLR）调控胆固醇代谢，是心血管疾病（如高胆固醇血症、动脉粥样硬化）的重要靶点。ELISA试剂盒用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清中的PCSK9浓度。

 2. 检测原理

采用双抗体夹心ELISA法：

包被抗体：微孔板预包被抗人PCSK9单克隆抗体。

样本反应：样本中的PCSK9与包被抗体特异性结合。

检测抗体：加入生物素或HRP标记的二抗，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入TMB等底物显色，450 nm处OD值与PCSK9浓度成正比。

二、核心特点

高灵敏度与特异性

检测下限通常为0.1–0.5 ng/mL，可排除其他前蛋白转化酶（如PCSK7）的交叉反应。

宽线性范围

常见范围：0.5–100 ng/mL（覆盖生理及病理浓度）。

样本兼容性

适用于血清（避免溶血）、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清等。

标准化设计

提供预包被板、即用型试剂，减少操作误差，支持96孔高通量检测。

三、主要应用场景

心血管疾病研究

评估PCSK9抑制剂（如阿利西尤单抗）的疗效，或患者血清PCSK9水平与LDL-C的关联性。

代谢性疾病

糖尿病、非酒精性脂肪肝（NAFLD）中PCSK9的异常表达分析。

药物开发

新型降脂药物的靶点验证及药效学评价。

四、操作流程（简化版）

样本处理：离心去除颗粒物，避免反复冻融（建议分装保存）。

加样与孵育：标准品/样本加入微孔板，室温或37℃孵育1–2小时。

洗涤与检测：洗板后加入酶标二抗，显色终止后读取OD值。

数据分析：通过四参数 logistic（4PL）曲线拟合计算浓度。

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五、注意事项

干扰因素

高脂血症样本可能需稀释；避免使用枸橼酸钠抗凝血浆（可能影响结合）。

质量控制

每板需包含标准曲线、空白孔及质控样本（批内CV＜10%）。

试剂保存

未使用的微孔板需密封防潮，酶标抗体避光保存于4℃。