人基质金属蛋白酶9(MMP-9)elisa试剂盒

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一、检测原理与技术特性‌:

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被高特异性抗MMP-9单抗（如小鼠IgG1），靶向结合MMP-9的活性或总蛋白形式（检测范围0.1–100 ng/mL）。

信号放大系统：HRP或链霉亲和素-生物素标记的二抗，搭配超敏化学发光底物（灵敏度达0.05 ng/mL）。

抗干扰设计：含EDTA（抑制MMP-9自降解）和金属离子螯合剂，确保检测稳定性。

 动态范围优化

覆盖生理水平（健康人血清1–10 ng/mL）至病理浓度（如肿瘤转移患者＞50 ng/mL）。

核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗MMP-9抗体固定化（针对酶原或活性形式，批间差＜7%）

标准品  重组人MMP-9（0、0.5、2、5、10、20、50、100 ng/mL，含TIMP-1结合位点）

适用样本  血清（避免溶血）、血浆（枸橼酸钠抗凝）、组织匀浆（需含蛋白酶抑制剂）

特殊添加剂  含0.01% NaN?防腐剂，2–8℃保存有效期24个月

三、临床应用与科研价值

疾病诊断与预后

肿瘤转移：乳腺癌、结直肠癌患者血清MMP-9升高与侵袭性正相关（＞30 ng/mL提示高风险）。

心血管疾病：动脉粥样硬化斑块不稳定患者MMP-9水平显著升高。

炎症性疾病：类风湿关节炎滑液中MMP-9浓度反映关节破坏程度。

机制研究

细胞外基质降解、上皮-间质转化（EMT）等过程的分子调控。

四、操作规范与质控要点

关键步骤

样本处理：组织样本需含10 mM EDTA的裂解液（抑制金属蛋白酶活性）。

温育条件：37℃避光45分钟，避免振动（防止非特异性结合）。

干扰控制

避免使用肝素抗凝血浆（影响MMP-9与TIMP-1结合）。

质控标准

每板需含标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜10%）。

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五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可区分MMP-9酶原与活性形式（需选配特定抗体）  无法检测MMP-9/TIMP-1复合物

特异性  与MMP-2/MMP-12交叉反应＜0.01%  样本需快速处理（室温下易降解）

通量  适配高通量筛查（如自动化工作站）  组织样本需优化均质化方法