人褪黑素(melatonin)elisa试剂盒

                                             人褪黑素(melatonin)elisa试剂盒
1. 检测原理‌:

基于 竞争性ELISA法（酶联免疫吸附试验）：

样本中的褪黑素与预先包被在微孔板上的褪黑素衍生物竞争结合有限的辣根过氧化物酶（HRP）标记的褪黑素抗体。

洗涤后，加入显色底物（如TMB），酶催化反应产生颜色，颜色深浅与样本中褪黑素浓度成反比。

通过酶标仪测定吸光度（OD值），对照标准曲线计算褪黑素浓度。

 2. 主要组成

预包被微孔板：96孔板（可拆卸），包被褪黑素抗原。

标准品：系列浓度褪黑素溶液（如0、5、20、50、100、200 pg/mL），用于绘制标准曲线。

酶标抗体：HRP标记的抗褪黑素抗体。

显色底物（TMB）：产生蓝色反应，终止后变黄色。

终止液（酸性溶液）：终止反应。

洗涤缓冲液（10-20×浓缩液）：需稀释后使用。

样本稀释液：用于稀释高浓度样本。

3. 样本要求

血清/血浆：建议EDTA或肝素抗凝，避免反复冻融。

唾液/尿液：需离心去除杂质，可能需调整pH。

组织匀浆：需裂解离心取上清。

稳定性：-20℃或-80℃长期保存，避免反复冻融。

4. 操作步骤（简版）

加样：标准品/样本加入对应孔，加入酶标抗体。

孵育：37℃避光反应30-60分钟。

洗涤：洗板5次，去除未结合物。

显色：加TMB底物，避光反应15分钟。

终止：加终止液，颜色由蓝变黄。

检测：450nm波长读OD值（参考波长630nm）。

5. 技术参数

灵敏度：通常为1-10 pg/mL（因品牌而异）。

检测范围：5-500 pg/mL（覆盖生理及药理浓度）。

特异性：与褪黑素类似物（如5-HT、N-乙酰血清素）交叉反应低。

精密度：板内/板间变异系数（CV）<10-15%。

回收率：80-120%（验证样本处理效果）。

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