人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)elisa试剂盒

1. 概述

**单核细胞趋化蛋白1（Monocyte Chemoattractant Protein-1, MCP-1/CCL2）**是CC趋化因子家族的重要成员（分子量13kDa），由内皮细胞、巨噬细胞等产生，通过结合CCR2受体介导单核细胞/巨噬细胞的定向迁移。其表达水平与动脉粥样硬化、类风湿关节炎、肿瘤转移等多种炎症性疾病密切相关，是炎症微环境的关键标志物。

 2. 检测原理

采用高灵敏度双抗体夹心ELISA：

预包被抗MCP-1单抗（克隆号：5D3-F7）捕获样本中的MCP-1

加入生物素标记检测抗体（克隆号：2H8-B3）形成复合物

链霉亲和素-HRP催化TMB显色

OD值与MCP-1浓度呈正相关（检测范围：15.6-1000 pg/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃（含干燥剂）  高结合力聚苯乙烯板

MCP-1标准品  0-1000 pg/mL  -20℃（冻干粉）  NIBSC 89/548标定

生物素标记抗体  110 μL  -20℃（避光）  亲和纯化山羊多抗

SA-HRP  110 μL  2-8℃  RZ>3.0活性保障

TMB底物  11 mL  2-8℃（棕色瓶）  超低背景配方

终止液  11 mL  室温  0.5M H?SO?

样本稀释液  20 mL  室温  含蛋白酶抑制剂

洗涤缓冲液（25×）  30 mL  室温  低泡型

4. 样本处理规范

适用样本：

血清（推荐静置30min后3000g离心15min）

血浆（EDTA抗凝优于肝素）

动脉粥样硬化斑块组织匀浆（1:9 PBS匀浆）

肿瘤微环境灌洗液（0.22μm过滤）

干扰控制：

避免使用溶血（Hb>0.5g/dL）或脂血（TG>500mg/dL）样本

细胞刺激实验建议用LPS（1μg/mL，6h）激活

稳定性：

4℃保存≤72h

-80℃可保存6个月（推荐分装）

5. 标准化操作流程

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL去离子水复溶

7点梯度稀释（0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL）

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