人促卵泡生成素(FSH)elisa试剂盒

1. 检测原理

双抗体夹心ELISA（主流方法）：

捕获抗体：微孔板预包被抗FSH单克隆抗体，特异性结合样本中的FSH。

检测抗体：生物素或酶标（HRP/ALP）抗FSH抗体，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

信号放大（若为生物素系统）：加入链霉亲和素-酶结合物（如SA-HRP）。

显色反应：TMB底物显色（蓝色→黄色），OD值与FSH浓度成正比。

注：部分试剂盒采用竞争法（检测FSH片段或小分子类似物）。

 2. 主要组分

组分  说明

预包被微孔板  96孔或48孔，包被抗FSH抗体

FSH标准品  重组人FSH（0-100 mIU/mL或更高）

酶标抗体  HRP/ALP标记的抗FSH抗体

链霉亲和素-HRP（如适用）  用于生物素系统信号放大

显色底物（TMB）  催化显色，终止后黄色

终止液  硫酸或磷酸溶液

洗涤缓冲液  PBS/TBS含吐温-20

样本稀释液  减少基质干扰（如高脂血）

3. 适用样本类型

血清（首选，避免溶血）：需静置凝固后离心（3000 rpm, 10 min）。

血浆（EDTA/肝素抗凝）：避免使用肝素钠（可能干扰检测）。

尿液（需浓缩或晨尿检测）：FSH排泄量波动大，建议多次取样。

其他：脑脊液、卵泡液（需验证稀释比例）。

样本保存：

短期（≤7天）可4℃保存，长期需-20℃/-80℃分装冻存（避免反复冻融）。

4. 操作步骤（简化版）

加样：标准品/样本加入微孔板（建议复孔）。

孵育（37℃, 1小时）：FSH与捕获抗体结合。

洗涤：去除未结合物质。

加酶标抗体（37℃, 30-60分钟）。

洗涤后加显色底物（TMB, 避光15分钟）。

终止反应，测450 nm OD值（参考630 nm）。

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5. 数据分析

标准曲线：以标准品浓度（mIU/mL）为X轴，OD值为Y轴，拟合四参数逻辑曲线（或对数线性）。

计算浓度：根据样本OD值插值计算，注意稀释倍数（如尿液需×10）。