人Dickkopf相关蛋白3(DKK3)elisa试剂盒

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产品概述‌:

检测目标

DKK3（Dickkopf-3）是Wnt信号通路的调控蛋白，参与细胞凋亡、纤维化和肿瘤抑制，与慢性肾病、肝纤维化、心血管疾病及多种癌症（如前列腺癌、胶质瘤）密切相关。

检测原理

夹心法ELISA（主流）：采用双抗体（捕获抗体+生物素化检测抗体）特异性结合DKK3，通过链霉亲和素-HRP系统显色定量。

灵敏度：通常为10-50 pg/mL，线性范围覆盖0.1-20 ng/mL（满足体液样本检测需求）。

二、核心组分与操作流程

1. 试剂盒典型组分

组分  说明

预包被抗DKK3抗体板  高亲和力小鼠/兔抗人DKK3单克隆抗体

重组人DKK3标准品  浓度梯度（0-20 ng/mL），冻干粉需复溶

生物素化检测抗体  与DKK3不同表位结合，避免与DKK1/DKK2交叉反应（<5%）

显色系统  TMB底物+HRP酶，终止后450 nm检测

 2. 简化操作步骤

样本稀释：血清/血浆建议1:5稀释，细胞上清直接检测。

孵育与洗涤：37℃孵育1小时，洗板5次去除未结合物。

显色分析：加入TMB反应15分钟，终止后30分钟内读数。

三、技术特点与样本要求

高特异性

经ELISA验证，与DKK1/DKK2交叉反应低，适用于复杂样本（如腹水、组织匀浆）。

样本兼容性

血清/血浆（EDTA抗凝优于肝素）、尿液（需离心去沉淀）、细胞培养上清。

稳定性

开封后微孔板需干燥剂保存，标准品-80℃分装避免反复冻融。

四、应用场景

疾病诊断：

慢性肾病（DKK3作为肾小管间质纤维化标志物）。

肿瘤预后评估（如DKK3低表达提示肝癌不良预后）。

科研领域：

Wnt通路机制研究、抗纤维化药物开发。

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五、关键注意事项

干扰因素

溶血或脂血样本需超速离心（10,000×g, 10分钟）处理。

采样建议

尿液样本需记录晨尿或24小时尿量（浓度校正）。