U87MG+RFP人脑星形胶质母细胞瘤+RFP

细胞属性

该细胞系由PontenJ等建立，源于恶性神经胶质瘤。裸鼠皮下接种可成瘤。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带RFP基因。

1） 来源：人脑

2） 形态：上皮样，贴壁细胞

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

背景与特性：

来源：源自人类星形胶质母细胞瘤（WHO IV级），通过慢病毒转染或质粒转染稳定表达红色荧光蛋白（RFP），激发/发射波长约558/583 nm。

标志物：保留胶质瘤特征（GFAP部分阳性、Vimentin+），RFP信号稳定，适用于长期追踪实验。

突变谱：典型胶质母细胞瘤突变（如EGFR扩增、PTEN缺失、IDH1野生型）。

培养条件：

培养基：MEM（含Earle's盐） + 10% FBS + 1%非必需氨基酸（NEAA） + 1% Pen/Strep，37℃、5% CO。

传代：贴壁生长，80%汇合时用0.25%胰酶消化，避免过度消化（RFP可能脱落）。

二、核心研究应用

肿瘤动态示踪：

体内成像：裸鼠原位或异种移植模型中，通过活体荧光成像（IVIS）监测肿瘤生长/转移（Nature Methods, 2025）。

血管侵袭：联合CD31抗体标记血管，研究RFP+肿瘤细胞与血管的互作（共聚焦成像）。

治疗评估：

药物筛选：利用RFP荧光强度定量评估替莫唑胺（TMZ）或靶向药（如EGFR抑制剂）的疗效。

放疗研究：分析放疗后RFP+细胞的存活与DNA损伤修复（γ-H2AX标记）。

微环境互作：

与巨噬细胞（THP-1）共培养，研究RFP+肿瘤细胞对免疫细胞极化的调控。

三、实验关键注意事项

RFP稳定性维护：

定期用嘌呤霉素（1-2 μg/mL）或G418（根据载体抗性）筛选，防止RFP表达丢失；

避免长期暴露于强光（光漂白风险），成像时使用低强度光源。

样本处理：

体内实验：移植瘤组织需用4% PFA固定（避光），OCT包埋后冷冻切片；

流式分选：需设未转染亲本细胞作为阴性对照（排除自发荧光）。

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