NCI-H661[h661]人大细胞肺癌细胞 新品

NCI-H661[h661]人大细胞肺癌细胞

  细胞特性:

该细胞1982年建系，源自一位患有大细胞肺癌的男性的胸腔积液。该细胞角蛋白、波形蛋白阳性。

1） 来源：肺癌

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

细胞系背景与特性

NCI-H661细胞系是人大细胞肺癌（Large Cell Lung Cancer, LCLC）的一种常用体外模型，其主要特征如下：

组织来源：该细胞系源自一位43岁患有大细胞肺癌的白人男性的淋巴结转移病灶1。

细胞形态与生长方式：NCI-H661为贴壁生长型细胞，形态呈现上皮样特征1。

分子特征：该细胞系表达高水平的p53 mRNA，但未发现明显的DNA结构异常，提示其可能存在点突变或微小变异。此外，NCI-H661细胞对角蛋白和波形蛋白纤维染色呈阳性，而神经丝三联体蛋白呈阴性1。

培养与冻存操作流程

细胞复苏

配制完全培养基：基础培养基（如RPMI 1640）+ 10%胎牛血清（FBS）+ 1%双抗（青霉素/链霉素）。

快速化冻：将冻存的细胞从液氮中取出，放入37℃水浴中快速融化（约1分钟）。

离心重悬：将化冻的细胞与预热培养基混合，1000 rpm离心5分钟，弃上清后用2 mL新鲜培养基重悬。

接种培养：将细胞接种至T25培养瓶中，放入37℃、5% CO?培养箱中培养。

换液观察：24小时后更换新鲜培养基，并观察细胞贴壁情况（未贴壁细胞为死细胞）1。

细胞传代

消化处理：当细胞生长至80%-90%汇合度时，用PBS清洗后加入0.25%胰酶消化（约1~2分钟），镜下观察细胞变圆脱落。

终止消化：加入含FBS的完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞脱落。

离心接种：1000 rpm离心5分钟后重悬细胞，按1:2比例接种至新的培养瓶中

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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