NCI-H508人结肠直肠腺癌细胞

NCI-H508人结肠直肠腺癌细胞

 细胞特性:

NCI-H508 [H508] 是一种来源于转移至腹壁的细胞系，该细胞系从患者用 5-氟尿嘧啶治疗后获得。

1） 来源：大肠; 盲肠 结直肠腺癌

2） 形态：上皮细胞样 贴壁生长 少量圆形细胞漂浮聚集体

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用。

1. 细胞系基础信息

来源与病理特征

组织来源：源自一名结肠直肠腺癌（CRC）患者的原发肿瘤组织，属于低分化腺癌亚型，具有侵袭性表型。

保藏信息：可通过ATCC（CRL-2511）或DSMZ获取，部分实验室标记为H508-LUC（荧光素酶标记亚系）。

形态与标志物：

上皮样贴壁生长，部分条件下可形成类器官。

典型标志物：CK20+、CDX2+（肠道特异性转录因子），CEA分泌阳性。

分子特征

关键突变：

APC缺失（Wnt/β-catenin通路持续激活）。

KRAS突变（G12D），常见于结直肠癌，影响靶向治疗响应。

微卫星稳定（MSS），不适用于免疫检查点抑制剂单药研究。

代谢特点：谷氨酰胺代谢依赖性强，适合研究代谢抑制剂（如CB-839）。

2. 核心研究应用

（1）肿瘤发生机制

Wnt/β-catenin通路：用于探究APC缺失导致的β-catenin核积聚及下游靶基因（如c-Myc）调控。

转移模型：通过尾静脉注射构建肝转移模型（高转移倾向）。

（2）药物开发

靶向治疗：

对EGFR抑制剂（西妥昔单抗）耐药（因KRAS突变）。

敏感药物：MEK抑制剂（如曲美替尼）、PI3K/mTOR通路抑制剂。

化疗响应：对5-FU、奥沙利铂中等敏感，常联合用药研究。

（3）肿瘤微环境

炎症关联：高表达IL-8，与肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化相关。

3. 培养条件与注意事项

培养基：推荐RPMI-1640 + 10% FBS，添加1%非必需氨基酸（NEAA）。

传代：80%融合时胰酶消化，传代比例1:3至1:5，每周2次（增殖速度中等）。

质控要点：

STR鉴定：需定期验证（已知易与HT-29交叉污染）。

支原体检测：建议每月PCR筛查。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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