NCCIT人畸胎癌细胞

NCCIT人畸胎癌细胞

 细胞特性:

1985年Shinichi Teshima（日本东京，国立癌症研究所）从一个纵膈混合型生殖细胞肿瘤中建立了NCCIT细胞系。 这株多能性干细胞可以分化成体细胞和胚外组织。

1） 来源：疾病：多能性胚胎癌；畸胎癌

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1. 基本背景

来源：源自一名22岁男性睾丸胚胎癌患者的 原发性肿瘤（与EC细胞类似）。

分化潜能：具有 多能性，可分化为 三胚层（外胚层、中胚层、内胚层）细胞。

相关细胞系：与 Tera-2（2102EP亚系） 相似，但NCCIT分化能力更强。

2. 生物学特性

(1) 分子特征

多能性标志物：高表达 OCT4、SOX2、NANOG（维持干细胞性）。

畸胎瘤形成：在裸鼠皮下可形成 畸胎瘤（含多种分化组织）。

染色体：异倍体，约 60-70条染色体，典型癌细胞特征。

(2) 培养条件

培养基：DMEM高糖 + 10% FBS（胎牛血清）。

培养环境：37℃、5% CO，贴壁生长（需胰酶消化传代）。

传代比例：1:3至1:6（约80%汇合时传代）。

生长速度：倍增时间 24-36小时。

3. 主要研究应用

干细胞研究

研究 多能性维持机制（OCT4/SOX2调控）。

诱导分化（如视黄酸RA诱导神经分化）。

 癌症研究

研究 胚胎癌（EC）的恶性转化。

化疗药物敏感性测试（如顺铂、依托泊苷）。

 基因编辑模型

可用于 CRISPR/Cas9基因敲除（如研究OCT4功能）。

建立 报告基因系统（如荧光标记分化路径）。

 体内实验

可注射到 免疫缺陷小鼠（如NOD/SCID）形成畸胎瘤，验证多能性。

4. 注意事项

 支原体污染：定期检测，避免影响实验结果。

 分化控制：未处理时可能自发分化，需优化培养条件。

 细胞鉴定：通过 STR分析 验证身份（NCCIT的STR谱可在ATCC查询）。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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