MCF-10A人乳腺上皮细胞

MCF-10A人乳腺上皮细胞

细胞特性:

1） 来源：人

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x106  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

来源与背景

MCF-10A是从一名36岁女性乳腺纤维囊性病变组织中分离的 非致瘤性上皮细胞（ATCC CRL-10317），常用于正常乳腺生理和癌前病变研究。

关键特性：

二倍体核型，保留乳腺导管上皮形态（铺路石样生长）。

雌激素受体（ER-）、孕激素受体（PR-）、HER2-，适合三阴性乳腺癌对照研究。

依赖生长因子：需外源EGF（20 ng/mL）和胰岛素（10 μg/mL）维持增殖。

培养条件

培养基：DMEM/F12 + 5%马血清 + 20 ng/mL EGF + 0.5 μg/mL氢化可的松 + 10 μg/mL胰岛素 + 100 ng/mL霍乱毒素（ATCC推荐配方）。

传代要点：0.25%胰酶消化5-7分钟，1:3至1:4分传，每周2-3次。

2. 科研应用场景

（1）乳腺正常生理研究

极性形成：通过3D培养（Matrigel）模拟乳腺腺泡结构，研究细胞极性和凋亡调控。

代谢分析：糖酵解与氧化磷酸化在正常乳腺上皮中的平衡机制。

（2）癌症转化研究

癌变模型：

基因编辑（如KRAS G12V转染）诱导恶性转化。

与MCF-7等癌细胞共培养，研究微环境互作。

药物毒性测试：评估化疗药物（如阿霉素）对正常上皮的损伤。

（3）乳腺癌预防

植物化合物（如萝卜硫素）的化学预防效应验证。

3. 操作注意事项

支原体风险：定期PCR检测（建议每月1次），因其对支原体高度敏感。

形态异常处理：若细胞变长或成纤维化，需重新铺板并验证培养基成分（尤其霍乱毒素活性）。

冻存复苏：使用90% FBS + 10% DMSO，存活率通常＞80%。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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