HGC-27+YFP人胃癌细胞黄色荧光标记

HGC-27+YFP人胃癌细胞黄色荧光标记

 细胞特性:

1） 来源：人胃癌

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞背景

HGC-27：未分化胃癌细胞系（源自淋巴结转移灶），具有高转移性、上皮样形态，常用于胃癌侵袭、迁移及药物敏感性研究。

YFP标记：通常通过慢病毒或质粒转染将YFP基因（如pEYFP-C1载体）整合到细胞基因组中，实现稳定表达。

荧光特性：激发波~51nm，发射波~52nm（需荧光显微镜或流式细胞仪检测）。

2培养条件

基础培养基：RPMI-16410FB1青霉素/链霉素（常规配方）。

传代：

消化：0.25胰蛋白酶-EDTA（37℃，2-3分钟），镜下观察细胞变圆后终止。

接种密度：建议1-2×10cells/cm2（贴壁较快，避免过度融合）。

荧光维持：

定期嘌呤霉素（Puromycin筛选（若载体含抗性基因，浓度需预实验确定，通常1-1μg/mL）。

避免长期传代后荧光丢失，可冻存早期批次备用。

3实验应用

活细胞成像：实时观察细胞迁移、侵袭（如Transwell小室联合荧光显微镜）。

体内示踪：构建小鼠移植瘤模型，通过活体成像仪（IVIS）监测YFP信号。

共培养系统：与基质细胞共培养，研究肿瘤-微环境相互作用

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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