BT-474人乳腺导管癌细胞

BT-474人乳腺导管癌细胞

 细胞特性:

E. Lasfargues和W.G. Coutinho从一个实心的乳腺浸润性导管癌中分离到了BT-474细胞株。

细胞特性

1） 来源：乳腺导管癌

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞系背景与特性

起源：源自一名60岁女性乳腺导管癌患者的胸腔积液，属于HER2阳性（ER+/PR+/HER2+）三阳性乳腺癌模型

分子特征：

HER2基因扩增（IH3+，FISH阳性）

常见PIK3CA突变（H1047R热点突变）

高表达雌激素受体（ERα）和孕激素受体（PR）

2培养条件与实验应用

培养基：RPMI-16410FB1GlutaMA1μg/mL胰岛素

特殊要求：

需5CO湿润环境

贴壁较松散，建议使用胶原包被培养皿

核心研究方向：

HER2靶向治疗（如曲妥珠单抗耐药机制）

内分泌治疗敏感性（他莫昔芬/氟维司群响应）

肿瘤干细胞富集（CD44+/CD24-表型）

3质量控制要点

必检指标：

HER2表达验证（每3个月通过WesterBlot）

STR鉴定（参照ATCC标准）

常见问题：

聚团生长：可通过短暂胰酶消化（0.25%胰酶1分钟）改善

支原体污染：建议每月PCR检测

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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