MDBK牛肾细胞

MDBK牛肾细胞

 细胞特性:

S.H. Madin和N.B. Darby从一只表观正常的成年牛肾脏建立了MDBK细胞株。

细胞特性

1） 来源：牛 肾  正常细胞

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞背景与特性

来源

源牛（Botaurus的正常肾脏组织，是一贴壁上皮样细胞系。

全称：Madin-DarbBovinKidney（MDBK）细胞，MadiDarb于1958年建立。

应用领域：广泛用病毒学、疫苗生产、兽医学研究。

关键特性

形态：上皮样，贴壁生长，单层铺路石样排列。

病毒敏感性：

牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛呼吸道合胞病毒（BRSV）、口蹄疫病毒（FMDV等。

部流感病毒（如H5N1、H1N1也可在MDBK中培养（需TPCK-胰酶辅助）。

遗传稳定性：非转化细胞，但可长期传代（建议使用低代次细胞）。

2培养条件与操作

培养基

基础培养基：MEM（MinimuEssentiaMedium）DMEM（高糖）。

补充物：

10胎牛血清（FBS，需确保无BVDV污染）。

1非必需氨基酸（NEAA）、mL-谷氨酰胺。

特殊需求：部分实验需添μg/mTPCK-胰酶（促进流感病毒复制）。

培养环境

37°C、5CO，湿度饱和。

传代比例：1:1:5（80-90汇合时传代）。

消化方法：0.25胰蛋白酶-EDT消2-分钟。

冻存与复苏

冻存液：90FB10DMSO，密1×10cells/mL。

复苏后：静2小时再换液，避免频繁移动。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

公司出售的产品：