DH-82狗肾恶性组织细胞增生症细胞

DH-82狗肾恶性组织细胞增生症细胞

 细胞特性:

DH82细胞具有类似巨噬细胞形态，并能吞噬乳胶颗粒。 细胞具有Fc gamma受体阳性，Fc mu和C3b受体阴性。 细胞不生成IL-1。

细胞特性

1） 来源：狗、雄性、恶性组织细胞增生症

2） 形态：巨噬细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

1细胞背景与特性

来源与疾病背景

源犬（狗）恶性组织细胞增生症（MalignanHistiocytosis的脾脏组织，Wellman等（1989建立，是研究该疾病的重要模型。

组织学特征：属单核-巨噬细胞系统，具有组织细胞（巨噬细胞前体）特性。

关键特性

形态：贴壁生长，呈梭形或星形，部分细胞可悬浮（因活化状态变化）。

标志物表达：

阳性：CD18（白细胞整合素）、CD11b/c（巨噬细胞标记）、MHII类分子。

阴性：淋巴细胞标记（如CD3、CD20）。

功能特性：

保留部分巨噬细胞功能（如吞噬作用、细胞因子分泌）。

可用犬类免疫肿瘤学研究。

2培养条件与操作

培养基

基础培养基：RPMI-164DMEM（高糖）。

补充物：

10-20胎牛血清（FBS，建议热灭活）。

1非必需氨基酸（NEAA）、m丙酮酸钠（可选）。

注意：部分批次需添β-巯基乙醇（5μM以维持活力。

培养环境

37°C、5CO，湿度饱和。

传代比例：1:1:5（80汇合时传代，过度生长易脱落）。

消化方法

0.25胰蛋白酶-EDT消3-分钟（部分细胞可能需细胞刮辅助）。

冻存与复苏

冻存液：90FB10DMSO，密1×10cells/mL。

复苏后：静4小时再换液（DH-82贴壁较慢）。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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