B95-8EBV 转化的绒猴白细胞

B95-8EBV 转化的绒猴白细胞

 细胞特性:

B95-8细胞株源自暴露于人白血球中抽提的EB病毒的绒猴白血球。B95-8是一个连续株并释放高滴度的转染EB病毒。此细胞株提供EB病毒用于建立人的连续淋巴细胞株。

细胞特性

1） 来源：绒猴 外周血淋巴细胞

2） 形态：淋巴母细胞样，悬浮生长

3） 含量：>1x10^6 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞背景与特性

来源与转化机制：

由EB病毒（Epstein-BarvirusB95-8毒株）体外感染绒猴（Callithrijacchus）外周血白细胞（主要为B淋巴细胞）后永生化建立。

关键特征：

持续分泌具有感染性的EBV病毒颗粒；

表达EBV潜伏期抗原（如EBNA-1、LMP-1），适合研究EBV潜伏感染机制；

悬浮生长，聚集成团，需定期吹散。

2培养条件与实验要点

培养基：

RPMI-16415-20FBS（需高血清浓度维持活力）；

添加1GlutaMAX（预防悬浮细胞代谢应激）。

传代与冻存：

每3-4天按1:2比例传代（细胞密度维持0.5-1×10cells/mL）；

冻存液：90FB10DMSO，程序降温后液氮保存。

注意事项：

严格生物安全防护（BSL-2级），避免EBV气溶胶暴露；

定期检测支原体及EBV滴度（如qPCR检测病毒拷贝数）。

3主要研究应用

EBV相关研究：

病毒潜伏期与裂解期转换的分子调控；

抗EBV药物筛选（如Brincidofovir的体外疗效验证）。

免疫学工具：

作为EBV抗原来源，刺激T细胞培养（如CAR-T疗法开发）；

2025年新应用：用于EBV疫苗中和抗体效价评估（NPVaccine2025.06）。

跨物种感染模型：

研究EBV在非人灵长类中的宿主适应性突变。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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