PC12低分化+GFP大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞低分化+GFP

PC12低分化+GFP大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞低分化+GFP

 细胞特性:

该细胞系来自能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。这些细胞表达神经生长因子(NGF)受体。NGF可诱导产生神经表型。这些细胞不合成肾上腺素。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。

细胞特性

1） 来源：肾上腺嗜铬细胞瘤

2） 形态：多角形，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞系基础特性

来源与背景

PC12细胞：源自大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（嗜铬细胞瘤是一种神经内分泌肿瘤），具有神经内分泌细胞特性。

低分化状态：未分化PC12细胞增殖快、形态呈圆形或短梭形，缺乏成熟神经元突触结构，适合研究肿瘤增殖或药物筛选。

GFP标记：通过基因工程稳定表达绿色荧光蛋白（GFP），便于活细胞追踪、迁移实验或共聚焦显微成像。

关键标志物

神经内分泌标志物：表达嗜铬粒蛋白A（ChromograniA）、酪氨酸羟化酶（TH）。

GFP稳定性：需定期检测荧光强度（如流式细胞术），避免传代过程中荧光丢失。

2主要研究应用

神经生物学研究

神经分化模型：通过NGF（神经生长因子）诱导分化为神经元样细胞（长出突触），研究神经突触形成或退行性疾病（如帕金森病）。

神经毒性测试：评估环境毒素（如MPTP）或药物对神经细胞的损伤。

肿瘤与药物研究

肿瘤机制：研究嗜铬细胞瘤的增殖、侵袭或耐药性（如多药耐药蛋白MDR1表达）。

药物筛选：利用GFP标记高通量筛选抗肿瘤药物或神经保护剂。

荧光示踪技术

细胞迁移/移植：GFP标记便于体内外追踪细胞迁移（如脑损伤修复研究）。

共培养系统：与其他细胞（如星形胶质细胞）共培养时，GFP可区分细胞类型。

3培养与实验要点

培养条件

培养基：RPM16410马血清（HS5FB1%双抗（马血清对维持低分化状态更有效）。

传代：0.25%胰蛋白酶消化，传代比例1:3至1:6，避免过度汇合（>80%会自发分化）。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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