ATP-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(ATP-PEPCK)试剂盒微板法/96样 新品

ATP-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(ATP-PEPCK)试剂盒微板法/96样

产品简介：

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK)属于裂解酶家族，分为两种类型：一类是 ATP 依赖性即ATP－PEPCK（ EC 4.1.1.49），主要存在于开花植物、藻类及部分真菌和细菌中。

另一类是 GTP 依赖性即 GTP－PEPCK（ EC 4.1.1.32），主要存在于哺乳动物、鸟类、鱼类、昆虫、软体动物、扁虫、线虫、眼虫及部分真菌和细菌中。

ATP－PEPCK 催化磷酸烯醇式丙酮酸生成草酰乙酸，进一步在苹果酸脱氢酶的催化下，使NADH 氧化生成 NAD+ ，在 340nm 下测定 NADH 下降速率，即可反映 PEPCK 活性。

试剂盒组成和配制：

所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。

ATP-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（ATP-PEPCK)活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

样本制备：
① 组织样本：称取约 0.1g 组织，加入  1mL 提取液，进行冰浴匀浆。4℃×12000rpm 离心  10min，

取上清，置冰上待测。

[注]：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为 1 ：5~10 的比例进行提取。

② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入  1mL 提取液；

冰浴超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔  10s，重复  30

次）；
4℃×12000rpm 离心  10min，取上清，置冰上待测。
[注]：也可按照细菌或细胞数量(104 个)：提取液体积(mL)为 500~1000： 1 的比例进行提取。

③ 液体样本：直接检测。若浑浊，离心后取上清检测。