组织总磷含量测定试剂盒/分光光度法/48样

组织总磷含量测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率，进而为合理施肥提供依据。

测定原理：

总磷经消化后，转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法，一定条件下，钼蓝与磷酸根生成 660nm有特征吸收峰的物质，通过测定 660nm 光吸收，即可计算无机磷含     量，进而可计算出组织中总磷含量。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、蒸馏水和浓硫酸。

测定操作：

1.  分光光度计预热 30 min ，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。

2.  打开水浴锅，调节温度到 40℃。

3.  空白管：取 EP 管，依次加入 500μL 蒸馏水，500μL 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm测定吸光度， 记为 A 空白管。

4.  标准管：取 EP 管，依次加入 50μL 标准液，450μL 蒸馏水，500μL 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm测定吸光度， 记为 A 标准管。

5.  测定管：取 EP 管，依次加入 50μL 上清液，450μL 蒸馏水，500μL 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm测定吸光度， 记为 A 测定管。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。