人宫颈鳞状细胞癌；C-4II

                                                           人宫颈鳞状细胞癌；C-4II
产品信息：

人宫颈鳞状细胞癌C-4II细胞系是一种源自宫颈鳞状细胞癌的细胞系，常用于癌症研究。以下是其详细说明、培养操作和特性：

细胞特性

来源与背景：C-4II细胞系源自一名41岁女性的宫颈鳞状细胞癌组织。该细胞系常用于宫颈癌的研究，包括肿瘤发生机制、药物筛选和信号通路研究。

形态特性：细胞呈表皮细胞样形态，贴壁生长。

生长特性：生长较快，适合用于体外实验研究。

分子特征：表达宫颈鳞状细胞癌相关标志物，如p16、Ki-67等，具有宫颈癌细胞的典型特征。

2. 培养操作

2.1. 培养基与条件

培养基：推荐使用DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养环境：37°C、5% CO、饱和湿度环境。

换液周期：每2-3天换液一次，或根据细胞密度和培养基颜色变化及时更换。

2.2. 复苏与传代

复苏步骤：从液氮中取出冻存管，快速置于37°C水浴中解冻，将细胞悬液转移至含新鲜培养基的离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃上清后重悬细胞并接种培养瓶，置于培养箱中培养过夜。

传代方法：当细胞密度达80%-90%时进行传代。弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆后终止消化，轻轻吹打收集细胞，离心后用新鲜培养基重悬，按1:2至1:4比例分瓶传代。

2.3. 冻存

冻存液：90%胎牛血清（FBS）+10%DMSO。

冻存步骤：收集细胞，离心后弃上清，用冻存液重悬细胞，调整细胞密度至1×10?细胞/mL，分装至冻存管中，逐步降温后存于液氮或-80°C冰箱。

3. 研究应用

肿瘤机制研究：C-4II细胞常用于研究宫颈鳞状细胞癌的发生、发展机制，包括信号通路、基因表达调控等。

药物筛选：用于筛选和评估针对宫颈癌的新型药物，研究药物对细胞增殖、凋亡的影响。

基因功能研究：通过基因敲除、过表达等技术，研究特定基因在宫颈癌中的功能和作用机制。

4. 注意事项

污染防控：严格无菌操作，定期检测支原体、细菌、真菌污染。

细胞状态观察：定期在显微镜下观察细胞形态和生长状态，确保细胞健康。

生物安全：虽然生物安全等级为1级，但仍需遵循标准微生物操作规范。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

公司正在出售的产品：

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。