人正常肝细胞；QSG-770

                                                           人正常肝细胞；QSG-770
产品信息：

人正常肝细胞QSG-7701是一种源自人正常肝组织的细胞系，常用于肝脏生理和病理研究。以下是其详细说明、培养操作和特性：

细胞特性

来源与背景：QSG-7701细胞系从一位35岁女性的肝癌癌旁正常肝组织中分离建立。该细胞系被广泛用于肝脏相关研究，但由于STR检测显示其可能被HeLa细胞污染，使用时需谨慎。

形态特性：细胞呈上皮细胞样形态，贴壁生长。

生长特性：具有正常的肝细胞功能，如合成、代谢、解毒等，适合用于肝脏生理和病理机制研究6

分子特征：表达肝细胞特异性标志物，如白蛋白（Albumin）、细胞色素P450等，具有肝细胞的代谢功能。

2. 培养操作

2.1. 培养基与条件

培养基：推荐使用RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养环境：37°C、5% CO、饱和湿度环境。

2.2. 复苏与传代

复苏步骤：从液氮中取出冻存管，快速置于37°C水浴中解冻，将细胞悬液转移至含新鲜培养基的离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃上清后重悬细胞并接种培养瓶，置于培养箱中培养过夜。

传代方法：当细胞密度达80%-90%时进行传代。弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆后终止消化，轻轻吹打收集细胞，离心后用新鲜培养基重悬，按1:2至1:4比例分瓶传代。

2.3. 冻存

冻存液：90%胎牛血清（FBS）+10%DMSO。

冻存步骤：收集细胞，离心后弃上清，用冻存液重悬细胞，调整细胞密度至1×10?细胞/mL，分装至冻存管中，逐步降温后存于液氮或-80°C冰箱。

3. 研究应用

肝脏生理研究：QSG-7701细胞可用于研究正常肝细胞的生理功能，如代谢、合成、解毒等。

药物代谢研究：由于其具有肝细胞的代谢功能，常用于药物代谢和毒性研究。

疾病模型构建：可用于构建肝脏疾病模型，研究肝纤维化、肝硬化等疾病的机制。

4. 注意事项

污染防控：由于该细胞系可能存在HeLa细胞污染，使用前应进行STR鉴定以确认细胞身份。

细胞状态观察：定期在显微镜下观察细胞形态和生长状态，确保细胞健康。

生物安全：虽然生物安全等级为1级，但仍需遵循标准微生物操作规范。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。