人胚肾细胞；HEK-293T/17

                                                           人胚肾细胞；HEK-293T/17
产品信息：

HELAXB细胞是人宫颈癌细胞系（子宫颈腺癌来源），贴壁生长、上皮细胞样形态；培养用含10% FBS的MEM/DMEM等基础培养基，37℃、5% CO，贴壁能力较弱，需注意轻柔操作。

细胞背景与特性

来源与形态：子宫颈腺癌，上皮细胞样，贴壁生长。部分资料显示供体为31岁女性。

标志物与安全：角蛋白阳性，含HPV18序列，p53表达较低；需在生物安全二级（BSL-2）环境操作。

生长与应用：增殖较快，可用于癌症机制、药物筛选、3D培养及转染实验。

培养操作

培养基与条件：MEM或DMEM基础培养基+10%胎牛血清（FBS）+1%双抗（P/S）；37℃、5% CO饱和湿度培养箱。

传代方法：

细胞密度80%-90%时，弃上清，PBS洗1-2次。

加0.25%胰酶/EDTA消化1-2分钟，镜下见变圆脱落即终止。

轻柔吹打成单细胞悬液，离心（1000rpm，5min），弃上清，重悬后按1:2至1:6比例分瓶。

复苏与冻存：37℃水浴快速解冻，离心去DMSO，重悬接种；冻存用90% FBS+10% DMSO程序降温后转入液氮/–80℃。

收到细胞后的处理与注意事项

处理步骤：75%酒精消毒瓶身，超净台静置3-4小时；密度<80%时加6ml完全培养基继续培养，>80%时直接传代。

注意事项：严格无菌操作，定期拍照记录状态；贴壁能力较弱，换液/消化勿强力冲洗或敲击瓶壁；仅限科研使用，不可用于人体或商业行为。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。