人非霍奇金淋巴瘤；Karpas 422

                                                           人非霍奇金淋巴瘤；Karpas 422
产品信息：

Karpas 422是一种人非霍奇金淋巴瘤细胞系，常用于淋巴瘤相关研究。以下是关于Karpas 422细胞的详细说明、培养操作和特性：

细胞特性

来源：Karpas 422细胞系来源于一名患有非霍奇金淋巴瘤患者的外周血淋巴细胞。

形态：淋巴母细胞样，通常呈悬浮生长。

生长特性：该细胞系具有快速增殖的特点，适合用于研究非霍奇金淋巴瘤的生物学特性、药物筛选及信号通路研究。

分子特征：表达B细胞标志物如CD19、CD20等，具有非霍奇金淋巴瘤的典型免疫表型。

2. 培养操作

2.1. 培养基

使用RPMI-1640培养基，添加10%-20%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素溶液（双抗）。

2.2. 培养条件

温度：37°C。

气体环境：95%空气 + 5% CO。

湿度：饱和湿度。

2.3. 传代步骤

观察细胞密度：当细胞密度达到适当水平时进行传代。

收集细胞：将细胞悬液转移至离心管中，以1200 rpm离心5分钟，弃去上清液。

重悬细胞：用新鲜培养基重悬细胞沉淀。

分装细胞：将细胞悬液按1:2至1:4的比例分装到新的培养瓶或培养皿中，加入新鲜培养基。

继续培养：将培养瓶或培养:皿放回培养箱中继续培养。

2.4. 冻存与复苏

冻存：使用含有90%胎牛血清和10%DMSO的冻存液，将细胞悬液分装到冻存管中，按照标准冻存程序逐步降温后存放在液氮罐中。

复苏：从液氮中取出冻存管，迅速放入37°C水浴中摇晃解冻，然后将细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中，离心后弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，接种到培养瓶中继续培养。

3. 注意事项

细胞状态监控：定期观察细胞形态和生长状态，确保无污染，并根据实验需求调整传代比例和培养条件。

悬浮培养适应：Karpas 422细胞通常呈悬浮生长，操作时需注意避免细胞聚集和沉降。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。