人肾透明细胞癌细胞带绿色荧光；Caki-2/GFP

产品信息：

人肾透明细胞癌细胞带绿色荧光Caki-2/GFP是一种稳定转染绿色荧光蛋白（GFP）的细胞系，源自64岁或69岁男性肾腺癌组织，具有贴壁生长、上皮样形态等特性。该细胞系在肿瘤研究、荧光示踪等领域有重要应用。

基本信息与特性

来源与背景：Caki-2/GFP细胞源自人肾透明细胞癌（肾腺癌），不同来源显示年龄为64岁（男）或69岁（男），组织为初期肾腺癌。细胞已稳定转染GFP基因，可发出绿色荧光，适用于荧光示踪、肿瘤机制研究。

生长特性：贴壁生长，上皮样形态，倍增时间约24-40小时（不同来源略有差异）。细胞可形成肾透明细胞癌肿瘤，生物安全等级为1级。

荧光特性：GFP荧光强度随传代次数增加而减弱，如需维持荧光，可用嘌呤霉素（10-20μg/ml）进行筛选。

培养操作

培养基与条件：推荐使用McCO's 5A培养基或RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）及1%双抗（青霉素/链霉素），培养环境为37℃、5% CO、饱和湿度。

复苏与传代：复苏时将冻存管37℃水浴解冻，混入含5-8ml培养基的离心管（1000 rpm，3-5分钟），重悬后接种T25瓶（6-8ml培养基），37℃培养箱培养。传代时细胞密度达80%-90%进行，贴壁细胞用PBS润洗1-2次，加0.25%胰酶-0.02%EDTA消化1-3分钟（显微镜观察细胞变圆脱落），加完全培养基终止消化，离心（1000 rpm，5分钟）后重悬，按1:2至1:4比例分瓶。

冻存：细胞消化后离心，弃上清，用无血清冻存液或90% FBS+10% DMSO重悬（1×10?细胞/ml），程序降温后存于液氮或-80℃。

注意事项与问题处理

污染防控：支原体、细菌、真菌检测需阴性，培养基更换每周2-3次，避免小黑点污染（可能为“黑胶虫”或蛋白结晶）。

操作要点：胰酶消化时间需严格控制（避免过度消化损伤细胞），离心后上清处理需用移液枪吸净，减少细胞损失；收到细胞后需拍照记录状态（如培养瓶外观、细胞形态），作为售后依据。

特殊问题：贴壁细胞运输途中脱落时，收集脱落细胞离心后用PBS清洗，加胰酶消化20秒，终止消化后重新铺平；悬浮细胞可直接离心重悬分瓶。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

公司正在出售的产品：