食管鳞状细胞癌；KYSE-180 (STR)

产品信息：

KYSE-180 (STR) 是一种人食管鳞状细胞癌细胞系，常用于癌症研究。以下是其详细说明、培养操作及特性：

1. 细胞背景

来源：KYSE-180细胞系从一名53岁男性食管鳞状细胞癌患者的胸腔内食管肿瘤组织中建立。

应用：广泛用于食管癌的生物学特性研究、药物筛选及治疗策略开发。

细胞特性

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

生长特性：倍增时间约为15-50小时，具体取决于培养条件。

STR鉴定：经过短串联重复序列（STR）鉴定，确保细胞系的身份和纯度。

3. 培养操作

培养基

推荐使用RPMI 1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%抗生素（如青霉素/链霉素）。

培养条件

温度：37℃。

气体环境：5% CO、95%空气的湿润培养箱。

传代步骤

观察细胞：当细胞汇合度达到80%-90%时进行传代。

移除旧培养基：轻轻吸出旧培养基，用PBS清洗细胞一次。

消化细胞：加入适量胰酶-EDTA溶液，37℃孵育至细胞脱落（通常1-2分钟）。

终止消化：加入含血清的培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞悬浮。

分装细胞：将细胞悬液按适当比例分装到新培养瓶中，补加新鲜培养基。

继续培养：置于培养箱中继续培养，定期观察细胞状态。

冻存与复苏

冻存：使用含10% DMSO和90% FBS的冻存液，分装至冻存管中，逐步降温后存于液氮罐或-80℃冰箱。

复苏：从液氮中取出冻存管，迅速投入37℃水浴中融化，随后转移至含预热培养基的培养瓶中，轻轻混匀后放入培养箱。

4. 注意事项

无菌操作：全程需在超净工作台中进行，避免污染。

定期检测：建议定期进行支原体检测和STR鉴定，确保细胞系的纯度和身份。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

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